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光电荧光显微镜制作标本的流程

重庆光电荧光显微镜样品必须用石蜡包埋并用明矾苏木精染色荧光染料DAPI用于荧光观察,石蜡切片过程如下:

1、取材:刀片应锋利、薄,组织厚度约2-3mm,大小为1.5×1.5×0.2~0.3cm。采样时间越快越好

2、固定:取下组织后立即放置10%福尔马林(相当于4%甲醛)

注:(1)固定液用量应为组织体积的40倍

(2) 固定时间与所用的固定剂类型、组织块大小和温度有关。通常是3-24小时

(3) 大部分固定温度可在室温下固定,低温(4℃时)应延长时间

(4) 固定容器应该更大

重庆光电显微镜1.png


3、冲洗:用自来水冲洗2-10小时

4、脱水:从低浓度酒精到高浓度酒精

70%(几分钟)→80%(60-120')→90%(60-120')→95%(60-120')→95%(60-120')→95%(60-120')→100%(60-120')→100%(60-120')

5、透明性:组织块脱水后必须通过一种能与酒精混合溶解石蜡的溶剂,这样石蜡才能进入组织块。常用二甲苯,可浸泡30米

6、浸渍:将透明组织浸渍到熔化的石蜡中的过程称为浸渍。一般浸渍2~3次,总时间3~4h,浸蜡用石蜡熔点52~56℃


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